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荧光分光光度计的荧光分光光度法试验

点击: 次 时间:2019-12-04 17:12


    荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。

    所用的仪器为荧光计或荧光分光光度计,按各品种项下的规定,选定激发光波长和发射光波长,并制备对照品溶液和供试品溶液。

    通常荧光分光光度法是在一定条件下,测定对照品溶液荧光强度与其浓度的线性关系。当线性关系良好时,可在每次测定前,用一定浓度的对照品溶液校正仪器的灵敏度;然后在相同的条件下,分别读取对照品溶液及其试剂空白的荧光强度与供试品溶液及其试剂空白的荧光强度,计算供试品浓度。

    当浓度与荧光强度明显偏离线性时,应改用标准曲线法进行含量测定。

    对易被光分解或弛豫时间较长的品种,为使仪器灵敏度定标准确,避免因激发光多次照射而影响荧光强度,可选择一种激发光和发射光波长与供试品近似而对光稳定的物质配成适当浓度的溶液,作为基准溶液。在测定供试品溶液时选择适当的基准溶液代替对照品溶液校正仪器的灵敏度。

 荧光分光光度计应用

    对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析,可应用于生物化学、生物医学、环境化工等部门。

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