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可见分光光度计的原理是什么

点击: 次 时间:2021-12-10 10:38

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上海仪电分析可见分光光度计系列,产品咨询请致电13513512998


国产可见分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

  单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

  式中:A为吸光度;I为透射的单色光强度; I0为入射的单色光强度;T为物质的透射率;k为摩尔吸收系数;L为被分析物质的光程,即比色皿的边长;c为物质的浓度。

物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。

国产可见分光光度计目前已经成为现代分子生物实验室常规仪器,主要用于检定物质、与标准物及标准图谱对照、比较吸收波长吸收系数的一致性、纯度检验、推测化合物的分子结构、络合物组成及稳定常数的测定。




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